产品货号:
SY0232
中文名称:
D-荧光素钾盐
英文名称:
D-Luciferin, Potassium Salt
产品规格:
100mg|500mg|1g|5g
发货周期:
1~3天
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D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。
D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素钠盐,以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素(游离酸)水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10mg/mL)和DMSO(50mg/mL)。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。
中文别名 | D-荧光素钾盐 |
英文别名 | (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt;D-Luciferin firefly,potassium salt |
CAS号 | 115144-35-9 |
分子式 | C11H7N2O3S2K |
分子量 | 318.42g/mol |
外观 | 淡黄色粉末 |
溶解性 | 溶于水(60mg/mL) |
纯度 | >95%(HPLC) |
组分 | 100mg | 500mg | 1g | 5g |
D-荧光素钾盐 | 100mg | 500mg | 1g | 5g |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,干燥避光,有效期一年。
- 本品(firefly luciferin)和甲虫荧光素(beetle luciferin)仅仅是不同公司在命名上的差异,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid。
- 注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
- 如果要进行ATP的检测,尽量避免外源ATP的污染,如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材,在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。
- 本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。如果有条件,可对储存液充入氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间长达1年。
- 在进行D-荧光素钾盐的溶解时,应使用无钙镁离子的DPBS,因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性,此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响,从而影响检测。
- 体外生物发光检测
- 用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100~200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。
- 用预热好的组织培养基将储存液稀释至0.15~0.3mg/mL的工作液浓度。
- 去除细胞培养基。
- 待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5~10min,然后进行图像分析。
- 用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100~200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。
- 活体成像分析
- 用无菌的DPBS (w/o Mg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。
- 用0.2μm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。
- 腹腔注射(i.p.),按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。
- 注射入体内10~15min(待光信号达到最强稳定平台期)后进行成像分析。
注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。
- 用无菌的DPBS (w/o Mg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。
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